นิตยสาร สสวท. ฉบับที่ 211 มีนาคม - เมษายน 2561

12 / 62

12
นิตยสาร สสวท
กิจกรรมการเรียนรู้พีซีอาร์ โดยใช้แบบจ�ลองและสถานการณ์จ�ลอง
วัตถุประสงค์
วิธีทำ�กิจกรรม: การเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอโดยเ คนิคพีซีอาร์ (สถานการณ์จ�ลอง)
วัสดุอุปกรณ์
1. เพื่อศึกษาวิธีการเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอโดย
เทคนิคพีซีอาร์
2. เพื่อสร้างสถานการณ์จ�ำลองการเพิ่มปริมาณ
ดีเอ็นเอในหลอดทดลอง
3. เพื่อรู้จักเครื่องมือส�ำหรับการเพิ่มปริมาณ
ดีเอ็นเอในหลอดทดลอง
4. เพื่อทราบวิธีการตรวจสอบผลิตภัณฑ์พีซีอาร์
(PCR product) โดยวิธีเจลอิเล็กโทรโฟรีซิส
แบบจ�ำลองพีซีอาร์ 1 ชุด ส�ำหรับนักเรียน 2 คนต่อกลุ่ม
1. แผ่นแม่เหล็กดีเอ็นเอต้นแบบ (DNA Template)
1 โมเลกุล
2. แผ่นแม่เหล็กไพร์เมอร์ (Oligonucleotide primers)
7 คู่ แต่ละคู่ประกอบด้วยฟอร์เวิร์ดไพรเมอร์ (Forward
primer) และรีเวิร์สไพรเมอร์ (Reverse primer)
3. แผ่นแม่เหล็กนิวคลีโอไทด์ (Deoxynucleoside
triphosphate : dNTPs) ชนิดละ 60 ชิ้น
4. กระดานเหล็ก
ภาพ 4 อุปกรณ์แบบจ�ำลองพีซีอาร์
1. สร้างสถานการณ์จ�ำลอง โดยสมมุติให้ห้องเรียนเป็นเครื่องพีซีอาร์ ครูเป็นผู้ก�ำหนดอุณหภูมิของ
เครื่องพีซีอาร์ แต่ละกลุ่ม คือ ผู้ด�ำเนินกิจกรรมพีซีอาร์ในหลอดทดลอง โดยแต่ละหลอดจะมีสาร ดังตาราง
ตาราง สารที่เป็นองค์ประกอบในปฏิกิริยาพีซีอาร์
ชนิดของสาร 1 reaction ( ) Final concentration
1. น�้ำกลั่นไร้เชื้อ 5.6 -
2. 10X PCR buffer 1.0 1X
3. 50 mM MgCl2 0.5 2.5 mM
4. 10 mM dNTPs 0.2 200 M
5. 5 pmol Forward primer 0.6 0.3 pmol/
6. 5 pmol Reverse primer 0.6 0.3 pmol/
7. Taq DNA Polymerase (5U/ ) 0.5 0.05 U/
8. ดีเอ็นเอต้นแบบ 1.0 5-100ng/
ปริมาตรรวม 10.0