13 / 62
13
ปีที่ 46 ฉบับที่ 211 มีนาคม - เมษายน 2561
2. น�ำหลอดทดลองใส่ในเครื่องพีซีอาร์ โดยสมมุติว่าห้องเปลี่ยนอุณหภูมิเสมือนเครื่องพีซีอาร์ ตั้งโปรแกรม
30 รอบของทั้งสามขั้นตอน ดังนี้
ขั้นที่ 1
Denaturation
ที่อุณหภูมิ 95
O
C เป็นเวลา 45 วินาที
ขั้นที่ 2
Annealing
ที่อุณหภูมิ 50
O
C เป็นเวลา 45 วินาที
ขั้นที่ 3
Extension
ที่อุณหภูมิ 72
O
C เป็นเวลา 45 วินาที
2.1 วางแผ่นแม่เหล็กดีเอ็นเอต้นแบบสายคู่บนแผ่นกระดานแม่หล็ก
2.2 ขั้น Denaturation จ�ำลองสถานการณ์เครื่องพีซีอาร์ท�ำงานที่อุณหภูมิ 95
O
C นักเรียนแยกสายแผ่นแม่เหล็ก
ดีเอ็นเอต้นแบบออกจากกัน
2.3 ขั้น Annealing จ�ำลองสถานการณ์เครื่องพีซีอาร์ท�ำงานที่อุณหภูมิ 50
O
C น�ำแผ่นแม่เหล็กฟอร์เวิร์ดไพรเมอร์
และรีเวิร์สไพรเมอร์ เข้าไปจับบริเวณที่เป็นคู่สมกันบนสายดีเอ็นเอต้นแบบ
2.4 ขั้น Extension จ�ำลองสถานการณ์เครื่องพีซีอาร์ท�ำงานที่อุณหภูมิ 72
O
C เอนไซม์ดีเอ็นเอโพลีเมอเรสเริ่มท�ำงาน
ด้วยการเชื่อมต่อนิวคลีโอไทด์ทั้งสี่ชนิด ตามเบสที่เป็นคู่สมกับเบสบนดีเอ็นเอต้นแบบ เสร็จสิ้น 1 รอบปฏิกิริยา